转录本最新娱乐体验_转录从3还是5端开始(2024年11月深度解析)
CRISPR-Cas13系统是一种新型RNA编辑工具,具有高效、精准的RNA切割和调控功能,在遗传疾病治疗、核酸检测、RNA成像和转录组调控等领域具有广泛应用前景。 1.RNA编辑 Cas13蛋白在crRNA的引导下可特异性编辑RNA,无需PAM序列,切割精准。 2.作用机制 CRISPR-Cas13系统通过适应、表达和干扰三个阶段发挥作用,包括识别crRNA、切割RNA和识别靶RNA。 3.应用现状 Cas13蛋白在核酸检测、RNA成像和转录组调控等领域展示出巨大的应用潜力。 4.未来发展 CRISPR-Cas13系统对于研究重要基因、基因特定转录本、非编码RNA等至关重要,具有极大的研究前景。 以上内容由AI检索 生成,你也可以捏合屏幕生成属于你的专属内容 @捏一下小助手
近日,「华大智造」中国客户体验中心举办了第一期DCS平台科研赋能体验班活动。基于国际领先的技术平台,本次体验班包含了理论介绍和实操演示两个部分。理论课程包括《基因组学技术原理》、《华大智造单细胞一站式平台介绍》和《华大时空组学技术与时空云平台介绍》;实操演示部分则涵盖了DNBelab C-TaiM 4 单细胞液滴生成仪液滴生成、MGISP-100自动化建库模拟、MGISEQ-2000测序仪上机实操、时空透化实验与透化条件摸索、时空转录本捕获实验等内容。了解更多:理论与实操相结合,华大智造首期DCS平台科研...
RNA-seq学习笔记:第一天 ### RNA-seq转录组生信分析学习笔记:第一天 中心法则 1958年,弗朗西斯ⷥ 里克提出了中心法则(Central Dogma),这是生命科学中最基本和最重要的规律。中心法则指明了遗传信息的流动方向:DNA→DNA(DNA的自我复制),DNA→RNA(转录),RNA→蛋白质(翻译)。大多数生命都遵循这一规律。而RNA病毒中,部分存在RNA→RNA(RNA的自我复制),逆转录病毒则存在RNA→DNA(逆转录)。 转录组能解决什么问题 转录组广义上指在某一生理条件下,细胞内所有转录产物的集合,包括mRNA、ncRNA、rRNA等;狭义上指所有mRNA的集合。目前转录组测序及分析技术可以解决新基因的深度发掘、低丰度转录本的发现、转录图谱绘制、可变剪接的调控、代谢途径确定、基因家族鉴定及进化分析等问题。 젨𝕧建库测序流程 组织样取样-提取RNA-去除rRNA-打断,选取特定长度的片段(约300bp)反转录-PCR扩增建库-上机测序。去除rRNA的方法有三种:试剂盒去除(适用于原核生物)、加上一个oligo DT的磁珠富集mRNA、捕获,最常用的是第二种。 转录组数据分析流程 原始数据的质控-序列比对(有参)/转录本组装(无参)-基因、转录本表达定量-基因表达差异分析。有参和无参转录组数据分析的关注点有所不同。有参指的是测序物种有参考基因组,关注不同状态下的样本表达量差异;无参指的是物种没有参考基因组,更多的关注转录本的拼接。
解读火山图全攻略 你是否对火山图感到困惑?别担心,这篇指南将带你轻松解读火山图! 火山图在基因组、转录组、代谢组和蛋白质组等数据分析中发挥着重要作用。它直观地展示了研究内容的上调、下调及其数量。 ᠨ磨ﻥ 1️⃣ 纵轴代表-log10(P-value),经过DESeq2计算和Benjamini-Hochberg校正,阈值通常设定为-log10(P-value) < 0.05。 2️⃣ 横轴是log2 fold change,图中展示的阈值是绝对值大于1,但实际阈值可根据需求调整。 3️⃣ 颜色代表变化方向:红色表示上调,蓝色表示下调,灰色表示无意义。 젩过火山图,我们可以清晰地看到哪些基因、转录本、代谢物或蛋白质表现出显著的上调或下调。这对于科研工作者来说,是进行数据分析和解读的重要工具。 ᠧ诼你是否对火山图有了更深入的了解呢?快去试试吧!
滚蛋吧,条带! 在分子生物学研究中,条带问题可是个大麻烦。杂带和条带位置不对,这两种情况都得好好聊聊。 杂带问题:蛋白修饰惹的祸首先,最常见的原因是蛋白转录和翻译后的修饰。转录后,同一个转录本可能会因为选择性剪切而翻译出不同大小的蛋白,这些蛋白被称为剪接体。在进行实验前,你得仔细比对每个剪接体对目标蛋白结构域的影响,搞清楚到底该检测哪条主带,还是哪几条带。 在文献中看到的WB实验图片里,偶尔会出现双条带或多条带,这些都是研究过程中值得解释和讨论的现象。进行Western Blot实验时,你得清楚,针对某些目标蛋白的检测结果并不一定只有一条带。 此外,蛋白在翻译完成后可能会进行各种修饰,尤其是糖基化修饰。在一些分泌型蛋白和膜蛋白上,糖基化位点的存在会让一个蛋白的大小增加至两倍或更多。而且,同一个蛋白在不同样本中的糖基化修饰差别很大。 有些蛋白有前体和成熟体之分,这种蛋白一般在研究时需要了解。但为了防止信息差,你还是得跟客户解释这个蛋白本身的特性。 细胞状态不佳:基因变异惹的祸 另一种情况比较偶发:在细胞培养状态不好或细胞传代过多的情况下,由于基因组的变异,细胞会表达某种蛋白的截短蛋白。这种被截短、剪接后的靶蛋白可能是未经报道的,但由于仍存在抗原识别位点(或抗原表位)而被识别出来。一般情况下,可以通过裁膜避免。 等电点的影响 最后,别忘了考虑蛋白的等电点。蛋白质本身是有电荷的,当处于某一个pH值时,蛋白质电荷会被中和,这个数值我们称为等电点pI。大部分蛋白质的等电点小于6,所以在中性的电泳环境中,蛋白因为等电点小于pH值,因此带负电荷。但在某些情况下,蛋白等电点可能大于7甚至接近8,这时由于电泳条件不足以中和电荷,使得蛋白质带正电,在电场中迁移受到阻力,由此产生蛋白分子量变大的错觉。因此,marker仅能作为参考,而实际的主带仍然要结合蛋白特性进行判断。 总之,条带问题虽然麻烦,但只要了解了这些影响因素,就能更好地应对了。加油吧!ꀀ
表观组学与转录组学的奇妙世界 表观组学和转录组学是生物学领域的两大研究热点,它们分别关注基因表达和调控的可遗传变化以及RNA转录本的变化。 表观组学专注于在不改变DNA序列的情况下,通过表观遗传修饰(如甲基化、乙酰化等)来调控基因的表达和性状的变化。这种调控可以在不同的时间和环境条件下发生,从而影响生物体的生命活动。𑊊转录组学则主要研究RNA转录本的变化、转录调控以及与表观遗传学的联系。它主要关注基因表达的起始阶段,即RNA的合成和修饰过程。而表观组学则更侧重于基因表达的终末阶段,即RNA的翻译和修饰过程。 近年来,随着单细胞测序技术的发展,表观组学和转录组学逐渐结合起来,共同研究基因表达和调控的可遗传变化。这种联合研究不仅有助于我们更深入地理解生命的本质,还为疾病诊断和治疗提供了新的思路和方法。
쥟 芯片与高通量测序的对比 在基因研究领域,基因芯片和高通量测序技术是两种重要的工具。它们各有特点,适用于不同的研究场景。 芯片,基于探针与目标序列杂交的原理,能够一次性对大量基因进行筛查。它就像一个封闭的系统,主要对已知序列进行检测,非常适合定量分析。而且,它的实验周期通常更短哦! 高通量测序技术则是一个相对开放的系统,不仅能测到已知的序列,还能发现新的序列。这种技术非常适合研究那些参考序列较少的物种,或者想要发现新的转录本和基因表达的可变剪接等情况。슊ᠦ来说,基因芯片和高通量测序技术各有千秋。选择哪种技术,完全取决于你的研究需求和目标。无论你是想要快速了解已知基因的表达情况,还是想要深入探索未知的基因世界,总有一种技术会是你得力的助手!
多组学联合分析揭示唐氏综合症新机制 最近,意大利技术研究院(Istituto Italiano di Tecnologia, IIT)领导的一个国际科研团队,通过多组学联合分析,发现了唐氏综合症(Down Syndrome, DS)患者大脑中存在的保守细胞投射缺陷。这项研究结合了RNA测序和蛋白质组学分析,为唐氏综合症的脑生理病理学研究提供了宝贵的资源。 研究背景 唐氏综合症是最常见的遗传性认知障碍之一,其病因是人类21号染色体(HSA21)三倍体。然而,具体的分子机制如何导致DS大脑的各种病理现象,仍然是一个未解之谜。研究人员希望通过多组学分析揭示这些机制,以便为未来的临床干预设计提供新的潜在靶点。 研究方法 슧 究团队对来自唐氏综合症患者和健康对照组的脑样本进行了全面的RNA测序和蛋白质组学分析,样本包括海马和皮层两个不同的脑区。研究人员在这两种脑区分别分析了基因、转录本、蛋白质和微小RNA(miRNAs)的表达特征,并使用加权基因共表达网络分析(WGCNA)识别了与DS相关的表达网络。 研究发现 该研究的主要发现包括: 基因和转录本表达变化:研究发现,DS脑中大量基因和转录本的表达发生了显著变化。具体而言,研究团队在海马和皮层中分别鉴定出4827个和5548个差异表达基因(DEGs),以及5090个和4718个差异表达转录本(DETs)。 蛋白质表达变化:在蛋白质水平上,研究人员在海马和皮层中分别发现了1158个和1029个差异表达蛋白(DEPs)。约40%的DEPs在基因水平上也表现出差异表达,表明转录水平和蛋白质水平之间存在一定的相关性。 细胞类型富集分析:通过细胞类型富集分析,研究人员发现上调基因和转录本主要富集在胶质细胞(包括星形胶质细胞、微胶质细胞和少突胶质细胞)。 这项研究不仅揭示了唐氏综合症患者大脑中的一些新机制,还为未来的临床干预提供了新的潜在靶点。希望这些发现能帮助我们更好地理解和治疗这种疾病。
北林博士带你玩转科研:从入门到高级技巧 嘿,大家好!我是来自北京林业大学(北林)的博士,今天想和大家分享一些关于科研的小技巧和心得。无论你是科研新手还是有一定经验的朋友,希望这些内容能对你有所帮助。 科研入门:从零开始 首先,对于刚开始接触科研的小伙伴们,我觉得最重要的是保持好奇心和耐心。科研其实就像一场马拉松,不是看你一开始跑得多快,而是看你能否坚持到最后。 转录组分析:从入门到精通 说到转录组分析,这可是科研中的一大块宝地。无论是基因魔方还是其他科研工具,都能帮你快速上手。比如,有个小工具可以几秒钟内搞定两个样本的转录本表达差异,是不是很方便?还有,从数据到结果,只需3秒!是不是很酷? 高效科研:省钱又省心 科研是需要花钱的,但怎么才能花得值呢?我有个小秘诀,就是学会优化成本。比如,转录组测序也能省一半的钱,关键是找到合适的方法和工具。这样不仅能省钱,还能提高效率,让你有更多时间去做更有意义的研究。 有趣又高效的小工具 除了科研工具,还有一些有趣的小软件可以帮你提高效率。比如,有个差异基因分析神器,几秒钟就能搞定两个样本的转录本表达差异。还有,从数据到结果,只需3秒!是不是很方便?这些小工具不仅能让你科研更轻松,还能让你的科研之路更加有趣。 科研入门的必看内容 如果你是新手,那一定要关注数据分析、SCI写作和绘图这些方面。这些都是科研中必不可少的环节。建议大家收藏一些实用的科研工具和资源,方便以后使用。 励志文案:与你共勉 最后,分享一些充满力量的句子给大家。生活有进有退,输什么也不能输了心情。加油,与你共勉! 希望这些内容能对你有所帮助。
𑠥騮᥅覔导从理论到实践! 引物设计的基本原则 选择目的基因的共有外显子区域进行设计。 引物长度建议在20到25bp之间,GC含量保持在40%到60%,Tm值最好在60℃左右。 设计引物时,尽量跨越外显子,上下游引物可以位于不同的外显子上。 引物的self complementarity和self 3' complementarity相加值应不超过8,单个值不超过5。 扩增产物长度建议在80到300bp之间,最佳为80到150bp。 避免设计含有4个或以上相同碱基(如AAAA、TTTT、GGGG、CCCC)的引物,以及避免明显的二级结构。 设计流程 寸 使用NCBI在线设计工具: 进入NCBI网站,搜索目的基因(如GAPDH)。 查看详细信息,找到共有外显子区域。 选择转录本信息,查看外显子位置。 进入引物设计页面,填写相关信息。 设置引物参数,如PCR产物大小、跨越外显子等。 点击“Get Primers”获取引物序列。 结果解读 在Graphical view of primer pairs部分查看每对引物跨越外显子的情况。 在Detailed primer reports部分查看引物质量和匹配情况。 通过以上步骤,你就可以轻松完成引物设计啦!
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